大家好~~在下銀白,久違的動筆,最近在實驗室實在是忙到崩潰,趁最近整修有點時間就來寫點文章~~希望大家會喜歡這篇
本次要介紹的是藥材鑑定的一部分,也就是組織切片的部分,剛好是在下這學期當TA要教的部分,想說就來介紹一下
在開始細部介紹前先介紹一下藥材的鑑定大概有哪些,大致上藥材的鑑定方式可以分成以下四種
1.傳統外觀:這是最原始的方法,直接去比較外觀的差異,但是很多時候還是有外觀類似分不出來的情況,或是藥材打粉,這時候就需要其他的輔助
2.組織切片:這是更進一步的鑑定,透過切片看顯微鏡下的畫面,找尋植物的特殊組織或結晶內含物,可以過濾部分粉末鑑定,但還是有其極限
3.化學成分:透過不同植物有不同的成分去分析,通常是打HPLC看圖譜,部分鑑定就是點TLC,傳統點的就是簡單的試劑看成分,但是缺點就是植物的成分與環境有關係
4.分子DNA:這算是最近很多人在嘗試的一塊,不過有DNA降解的問題,炮製加工後的藥材可能就測不出來
以上是現在常用的藥材鑑定大略分類,以下就開始來細細介紹組織切片
基本上藥材在做組織切片的時候,就是看各種植物會有不同的生長構型,像有些會有草酸鈣結晶在細胞中,有些植物的導管構型不一樣,或者看植物的纖維表皮等等,這些都是組織切片鑑定在注意的部分,而做這切片大概的流程如下
1.切片:切下藥材所需之表面,傳統的是用刀片切,現在有切片機輔助,目標是切1-3層細胞厚,方便顯微鏡觀察
2.製作玻片標本:利用適當的試劑及染劑製作玻片標本
3.顯微鏡鏡檢:放上顯微鏡尋找目標物做鑑定
以上是大概的流程,而試劑部分以咱們課程來說,做臨時標本常用的試劑有以下幾個
1. 水和氯醛溶液(Chloral hydrate solution) 可除去一般細胞內含物,僅殘留草酸鈣。乾後會形成結晶,影響觀察。
2.碘與碘化鉀試液(Potassium iodine-iodine solution) KI 2克溶於300mL的水中,再加1克碘溶解之。以棕色瓶保存。 可檢測出澱粉、蛋白質;與硫酸合用檢出細胞質、纖維素。
3. 蘇丹三號(Sudan 3 Solution) 可觀察油室。
4. 藤黃酚試液(Phloroglucinol-alcohol solution) 1~5%酒精溶液,與濃鹽酸各一滴,可檢測木化細胞膜,成紅色,但易褪色。
5. 甘油水(Glycerin water) 甘油與水以1:1混合,為臨時切片最常用的封鎖劑,亦有軟化劑之作用。
6. 甘油、酒精、水(Glcerin-alcohol-water) 三者等量混合,為Sudan 3 染色後的洗淨液
以上是組織切片的介紹,下面就來放個例子給大家看吧~~
以以混淆藥材中的白花蛇舌草與水線草為例,在易混淆藥材辨識網上所寫的傳統外觀鑑定如以下截圖,有興趣可以點連結去看
http://www.timing-life.com/tctcm/e-learn-icm/index.htm
但是呢,很多情況是分不出來,尤其當你拿到的只有莖的時候,就給大家看在下自己拿到的藥材吧
上為水線草,下為白花蛇舌草,說實話扣除莖的顏色,兩者幾乎是一模一樣,一不小心就會搞混了,所以這時候就只能靠莖的切片
左為水線草右為白花蛇舌草,透過切片染色後可以看到白花蛇舌草在木化纖維層外還有一層表皮,而且白花蛇蛇草木化纖維也沒水線草厚,透過這樣就可以做一個鑑定,這就是一個簡單的組織切片鑑定啦~~
好啦,本次的文就到這,有興趣想看更多切片的可以留言,在下手邊還有不少自己徒手切的切片照片,當初切的超累的,希望大家會喜歡~~
-銀白